珠美苹果树原产于日本北部的山区,是三叶<0>和毛山荆子的天然杂交种,以野生状态存在。因种子数量少,发芽困难,自然界数量很少。对其进行组织培养、快速繁殖是很有必要的。珠美<0>具有以下很突出的特征:
1.1珠美<0>的耐盐碱能力特蹦强
通过海滨盐碱地和内陆干旱地的栽培试验证明,珠美<0>能在含盐量为0.60%、pH=9.2的土壤中正常生长,是1个耐盐力很强的树种,它的耐盐力仅次于圣柳,强于枸杞、紫穗槐和杜梨,比苹果的其它砧木如平顶<0>、八棱<0>强得多。珠美<0>能在pH=3-9的范围内生长,因此珠美<0>对绿化和改造盐碱地有重要的意义。
1.2珠美<0>有很强的抗旱和抗病能力
1.3珠美<0>花色美观
其花期长,花厚,树体矮化,是美化和绿化城市的观赏树种。
1.4珠美<0>亲和力强
珠美<0>与许多苹果品种的亲和力强,嫁接后<0>冠开张,枝条粗壮,节简短,具有矮化效应。同时能使苹果在盐碱地栽培,扩大苹果栽培范围,是一种很有希望的苹果新砧木。
1.5效益显著
我国有1/4的耕地是盐碱地,多数干旱和半干旱地区存在大片的盐碱地、旱地和海滩,不能栽培苹果,利用珠美<0>抗盐碱的特性,不仅可以扩大苹果的栽培范围,而且可以绿化美化盐碱滩和荒山,珠美<0>有重大的经济效益、社会效益及生态效益。
2珠美<0>的组织培养与快速繁殖
2.1生产工艺流程
引进珠美<0>的野生种子——播种——选苗——茎尖培养——继代增殖——诱导生根——营养钵移栽——苗圃移栽。
2.2珠美<0>组培快繁的技术要点
2.2.1外殖体与处理
无菌外殖体的来源有3种:
①从珠美<0>健壮无病毒的植株上采萌而未发的顶芽;
②采休眠枝条在室内水培发芽;
③从田间采开始萌发并带有2~3片叶片的新梢。在超净工作台上将外植体用0.10%的升汞(加入2滴吐温20)灭菌10min,再用无菌水反复冲洗6—10遍,在无菌条件下剥取茎尖进行接种培养。
2.2.2初代培养和继代培养
接种在MS+6-BA0.50一Img/L+IAA0.50mg/L上的茎尖在25℃一28℃,相对湿度40%一60%,3 0001x光照,每天10—12h的培养条件下,1个月后,茎尖伸长和生长,此时将新长出的嫩芽剪下转入新鲜培养基上,培养40d后产生1—4片叶的茎丛,此时剪下具有3-4片展叶,高约3—4cm的嫩茎转入生根培养基诱导生根。把具有1—2片叶的嫩茎切下转入继代增殖培养基MS+6-BA 0.50ms/L+IAA0.50mg/L上继续扩大繁殖,如此反复进行,可得到大批量的生根苗和无根苗。珠美<0>每45d的增殖系数能达到8.80倍。
2.2.3生根和移栽
转入生根培养基上的珠美<0>嫩茎,经10。15d培养后一般都能生根,当根长0.50—1.50cm时,取出移栽,成活率较高。移栽时,将蛭石装入育苗盘中,移栽后浇足水并用塑料薄膜保湿,在15—20℃的温室内炼苗,使根系吸收能力和气孔的调节功能得以恢复,2个月后小苗开始生长,产生新根、新叶,此时可移栽入田间苗圃。
春季气温较低时,要搭小拱棚保温,夏季温度高时,要用草帘或遮阳网遮荫,并加强田间管理。9月以后移栽的小苗,当年若不出圃,待秋季落叶后,在苗基部培土防冻,次年再培育出圃。
3影响珠美<0>离体快繁的因素
3.1培养基
珠美<0>在盐离子较高的培养基上生长较好,因此多用改良MS并附加一定浓度的细胞分裂素和生长素,就能不断地增殖。生根培养基采用ASH培养基或MS培养基,并附加一定量的生长素。配置培养基时可选用质优价低的琼脂。增殖培养每升可加蔗糖或绵白糖30g,生根培养基糖浓度可减半。
3.2转接时间
转接时间和方法与珠美<0>在试管内的增殖或生根质量有很大的关系。初代培养,当茎尖增殖时要及时转到新鲜培养基上,以扩大繁殖。转接剪切时一定要去掉老的愈伤组织,有利于促进产生更多的丛生芽;生根培养与转接时间密切相关,苗龄过长,木质化程度高,生根率低;苗龄过短,木质化程度低,生根少而且根系短,移栽不易成活;Zui适苗龄应为40d左右。苗高3-4cm,有3~4片平展叶。
3.3继代次数
继代增值倍数与继代次数有关,继代培养代数过多,若超过100代转接繁殖时,繁殖系数可高达11.80倍,但芽纤细、弱小、茎多,移栽不易成活,因此继代培养代数不要超过60代为宜。
3.4培养条件
珠美<0>试管快繁质量与培养条件密切相关。恒温培养不如变温培养好;培养室密闭培养不如时时通风培养好;高温培养不如适当低温培养好;在生产过程中培养室的相对湿度在40%一60%为宜,当相对湿度超过80%时,试管苗易玻璃化且污染率高,湿度低于30%时。培养基易干,影响试管苗的生长;用透气封口膜封口比用不透气封口膜封口繁殖出的壮苗多。
4影响珠美<0>试管苗移栽的因素
4.1 自然光炼苗
由于培养室内光线较弱,试管苗的茎叶组织细嫩,移出试管后,光线变化剧烈,幼苗承受不了,易死亡,应逐步过渡。一种方法是移栽前20d,当根刚长出时,把试管苗带瓶放在自然散射光下炼苗20d并在移栽前打开封口膜,夏季在自然散射光下放置1-3d,春季放置3-5d,再取出移栽,经自然光炼苗的珠美<0>试管苗移栽成活率明显提高。
4.2移栽基质
基质是珠美<0>试管苗能否大批移栽成活的关键,经试验能用于珠美<0>试管苗移栽的基质有蛭石、珍珠岩、火山灰、砂、腐殖土、腐熟的秸秆等,其中以蛭石和腐熟的秸秆为好。
4.3苗龄
移栽的试管苗,苗龄30-40d、具有3-4片展叶、叶色浓绿的苗移栽成活率高,苗龄过长,根已老化的珠美<0>试管苗移栽成活率低。
4.4移栽条件
移栽时的温度、湿度、光照强度对移栽成活率有很大的影响。移栽后湿度应逐渐降低,长期保持高湿度易烂苗,剧烈降低湿度会使气孔调节功能不健全的珠美<0>试管苗干枯死亡,Zui好采用间湿间干的方式逐渐降低湿度来刺激珠美<0>试管苗使其恢复健全孔调节功能:光线也应逐渐加强;温度适当低一些以15℃-20℃为宜,过低不能生长,过高易烂苗。